Bakterioloogiline uurimismeetod: etapid, eesmärgid, omadused

Bakterite uuring on inimestele väga praktiline. Täna avati suur hulk prokarüootides, mis erinevad üksteisest patogeensuses, ulatus, kuju, suurus, arv flagella ja muud parameetrid. Selle tüve detailide uurimiseks kasutatakse bakterioloogilist uurimismeetodit.

Millised on bakterirakkude analüüsimise meetodid?

Et määrata, kas bakterid on patogeensed, viiakse kultuur läbi mitmel erineval viisil. Nende seas:

1. Bakterioskoopiline meetod.

2. Bakterioloogiline meetod.

3. Bioloogiline meetod.

tuberkuloosi mikroskoopia ja bakteriaalse uurimismetoodika põhinevad toimetusi prokarüootsetes rakkudes nagu bioloogilise analüüsi on vaja uurida mõju selliste rakkude elusorganismis katseloomade. Vastavalt aste manifestatsioon või muud haiguse tunnused teadlane võib järeldada olemasolu või puudumise patogeensete bakterite proovi, samuti nende looduslikult levivad keha loomade nende kultuuri ja kasutada mujal.

Bakterioloogiline uurimismeetod erineb bakterioskoopilisel meetodil. Esimeses etapis kasutatakse analüüsi jaoks spetsiaalselt ettevalmistatud prokarüootide kultuuri, kui teine ​​töötab slaidi surnud või elavate rakkudega.

Bakterioloogilise uurimismeetodi etapid. Mikrobioloogia

põhimõtet omaduste uurimiseks bakterkultuurile võib olla kasulik mikrobioloogid, teadlased, kes on sätestatud, et uurida prokarüootsetes rakkudes, samuti laboris, kelle ülesanne on kehtestada patogeensete või mitte-patogeensete bakterite ja seejärel patsiendi diagnoosi.

Bakterite uurimise protseduur on jagatud kolmeks astmeks:

1. Bakteri eraldamine esialgsest proovist.

2. Bakterite külvamine ja puhta kultuuri kasvatamine, selle omaduste uurimine.

3. Bakterirakkude üksikasjalik uurimine.

esimene etapp Proov või mustus võetakse ravimi vabast pinnast või patsiendist. Seega saame "kokteili" mitmesugustest bakteriliikidest, mida tuleb külvata toitainekeskkonnale. Mõnikord on võimalik otsekohe identifitseerida vajalikke baktereid, teades nende levikut kehas.

Pärast kahte või kolme päeva möödumist valitakse nõutud kolooniad ja padutakse steriilse silmusega Petri tasside tahkele söötmele. Paljud laborid töötavad katseklaasidega, kus võib esineda tahket või vedelat toiteelementi. Nii on ka bakterioloogiline uurimismeetod mikrobioloogias.

teise etapi

Saanud ühe bakterikolooniatele toimub vahetult makro- ja mikroanalüüsiga. Mõõdetakse kõik kolooniate parameetrid, määratakse nende värvus ja kuju. Seda tehakse sageli loendamaks kolooniaid Petri tassil ja seejärel lähtematerjalis. See on oluline patogeensete bakterite analüüsimisel, millest sõltub haigusaste.

bakterioloogiline uurimismeetodit 2 etapis mille kohaselt uuritakse üksikute kolooniate mikroorganismide saab liita bioloogilises analüüsimeetod baktereid. Teine eesmärk selles etapis on suurendada lähteainete hulka. Seda saab teha toitainekeskkonnas ja katsetes elusorganismides on võimalik katsetada in vivo. Patogeensed bakterid korrutatakse ja selle tulemusena sisaldab veri miljoneid prokarüootseid rakke. Võetud verest on bakterite vajalikku töömaterjali lihtne valmistada.

kolmanda etapi

Kõige olulisem osa uuringu - mõiste morfoloogilised, biokeemiliste toksilistest ja antigeense omadusi bakterid kultuuri. Tööd tehakse varem "puhastatud" põllukultuuridega toitainekeskkonnas ja mikroskoobi all koos preparaatidega( sageli värvitud).

Set liikmete patogeensete või oportunistlikud bakterid konkreetse taksonoomilise rühma, samuti teha kindlaks nende ravimresistentsuse võimaldab bakterioloogiliste uurimismeetod.3. etapp - antibiootikumid, st bakterirakkude käitumise analüüsimine keskkonda ravimite tingimustes.

Kultuuri resistentsuse uurimine antibiootikumile on väga praktiline, kui on vaja määrata konkreetse patsiendi jaoks vajalikud ja ennekõike tõhusad ravimid. Siin ja bakterioloogiline uurimismeetod võib aidata.

Mis on kultuurikeskkond?

Arenguks ja reproduktsiooniks peavad bakterid olema ettevalmistatud toitainekeskkonnas. Konsistentsi järgi võivad nad olla vedelad või tahked ning päritoluga - köögiviljad või loomad.

Toitainekeskkonna põhinõuded:

1. Steriilsus.

2. Maksimaalne läbipaistvus.

3. Happesuse, osmootse rõhu, vee aktiivsuse ja muude bioloogiliste koguste optimaalsed parameetrid.

isoleeritud kolooniate saamine 1. Drigalsky meetod. See seisneb mikroorganismide bakteriaalse silmusega erinevate mikroorganismide määrdega. See silmus viiakse läbi esimesel Petri tassil toitainekandjaga. Peale selle, ilma silmust muutmata, viiakse järelejäänud materjali meetod Petri teise ja kolmanda plaadiga. Seega, koloonia viimaste proovide korral ei tohi bakterid külvata liiga tihedalt, lihtsustades sellega töö leidmiseks vajalikke baktereid.

2. Kochi meetod. Ta kasutab torusid sula toitainekeskkonnaga. Bakteri määrdega on paigutatud silmus või pipett, mille järel toru sisu valatakse spetsiaalsele plaadile. Agar( või želatiin) külmub mõne aja pärast ja selle paksusest on lihtne leida vajalikke rakkude kolooniaid. Enne bakterite segu lahjendamist katseklaasis on oluline, nii et mikroorganismide kontsentratsioon ei oleks väga suur.

Bakterioloogiline uurimismeetod, mille etapid põhinevad soovitud bakterikultuuri eraldamisel, ei lähe ilma nende kahe isoleeritud kolooniate leidmise meetodita.

Antibiootiogramm

Visuaalselt võib bakterite reaktsiooni ravimitele täheldada kahel viisil:

1. Paberketaste meetod.

2. Bakterite ja antibiootikumide isoleerimine vedelas keskkonnas.

Paberketaste meetod nõuab mikroorganismide kultuuri, mida on kasvatatud tahke toitainekeskkonnas. Selles keskkonnas asetatakse mitu ümmarguse kujuga paberit, immutatud antibiootikumidega. Kui ravim ravib edukalt bakterirakkude neutraliseerimist, siis pärast sellist ravi jääb ala, kus puuduvad kolooniad. Kui antibiootikumide reaktsioon on negatiivne, jäävad bakterid ellu.

Vedelate toitelahuste kasutamisel valmistatakse kõigepealt mitu erineva lahjendusastmega bakteri kultuuri toru. Nendesse torudesse lisatakse antibiootikume ja päeva jooksul jälgivad nad aine ja mikroorganismide koostoimet. Lõpuks saadakse kvalitatiivne antibiootiogramm, millest saab hinnata ravimi efektiivsust antud kultuuri jaoks.

analüüsi peamised ülesanded Siin on uuritud bakterioloogilise meetodi eesmärgid ja etapid.

1. Saage algmaterjali, mida kasutatakse bakterikolooniate eraldamiseks. See võib olla mingi objekti, limaskestade või inimese keha õõnsuse pinnale määrimine, vereanalüüs.

2. Kultuuri kasvatamine tahke toitainekeskkonnale. Pärast 24-48 tundi Petri tassis leiad erinevate liikide bakterite kolooniad. Valime vajalikud morfoloogilised ja / või biokeemilised kriteeriumid ja teeme sellega koostööd.

3. Saadud kultuuri paljundamine. Bakterioloogiline uurimismeetod võib põhineda mehaanilisel või bioloogilisel meetodil bakterikultuuride arvu suurendamiseks. Esimesel juhul tehakse tööd tahkes või vedelas toitainekeskkonnas, kus bakterid korrutatakse termostaadiga ja moodustuvad uued kolooniad. Bioloogiline meetod nõuab bakterite arvu suurendamiseks looduslikke tingimusi, nii et katselooma nakatatakse siin mikroorganismidega. Mõni päev hiljem võib vereproovist või määrdumisest leida palju prokarüoide.

4. Tööd puhastatud kultuuriga. Bakterite süstemaatilise positsiooni ja nende patogeenide kuulumise kindlaksmääramiseks on vaja läbi viia rakkude põhjalik analüüs morfoloogiliste ja biokeemiliste omaduste järgi. Mikroorganismide patogeensete rühmade uurimisel on oluline teada, kui tõhus on antibiootikumide toime.

See oli bakterioloogilise uurimismeetodi üldine tunnusjoon.

Analüüsifunktsioonid

Bakterioloogiliste uuringute läbiviimise peamine reegel on maksimaalne steriilsus. Kui tööd tehakse katseklaasidega, tuleks bakterite kultuure ja transplantaate läbi viia ainult kuumutatud vaimu.

Kõik bakterioloogilise uurimismeetodi etapid nõuavad spetsiaalse silmuse või Pasteuri pipeti kasutamist. Mõlemad instrumendid tuleb eelnevalt töödelda vaimu laterna leegis. Mis puudutab Pasteuri pipetti, siis enne termilist steriliseerimist on pipeti ots pintsetide abil purustamiseks vaja.

Külvibakterite tehnikal on ka oma omadused. Esiteks, kui külv tahkele söötmele, tehke agari pinnal bakteriaalne silmus. Loom, loomulikult, peaks juba olema mikroorganismide proov pinnal. Kasutatakse ka kultuurikeskkonda külvamiseks, mille korral peab silmus või pipett jõudma Petri tassi põhja külge.

Töötades vedelaga, kasutatakse torusid. Oluline on veenduda, et vedelik ei puutu servi laboratoorsed klaasnõud või korgist ja kasutatud tööriistad( tilguti, hinge), ei puutu võõrkehad ja pinnad.

Bioloogilise uurimismeetodi tähtsus

Bakteri valimi analüüs on praktiliselt rakendatav. Kõigepealt võib bakterioloogilist uurimismeetodit kasutada meditsiinis. Näiteks on vaja uurida patsiendi mikrofloorat õige diagnoosi kindlakstegemiseks ja ka õige ravikuuri väljatöötamiseks. Siin aitab antibiootiogramm, mis näitab ravimite aktiivsust haiguste tekitaja suhtes. Analüüs

bakterite laboris kasutati määramiseks ohtlike haiguste nagu tuberkuloos, taastuv palavik või gonorröa. Seda kasutatakse ka mandlite, elundite õõnsuste bakteriaalse koostise uurimiseks.

. Keskkonnasaaste määramiseks võib kasutada bakterioloogilist uurimismeetodit. Objekti pinnalt oleva mustuse kvantitatiivse ja kvalitatiivse koostise järgi määratakse selle keskmise populatsiooni määr mikroorganismid.