Méthode bactériologique de la recherche: étapes, objectifs, caractéristiques
L'étude des bactéries est d'une grande importance pratique pour les humains.À ce jour, un grand nombre de procaryotes ont été découverts, qui diffèrent les uns des autres en ce qui concerne la pathogénicité, la distribution, la forme, la taille, le nombre de flagelles et d'autres paramètres. Pour étudier cette souche en détail, une méthode d'investigation bactériologique est utilisée.
Quelles sont les méthodes d'analyse des cellules bactériennes?
Pour déterminer si les bactéries sont pathogènes, la culture est effectuée de diverses façons. Parmi eux:
1. Méthode bactérioscopique.
2. Méthode bactériologique.
3. Méthode biologique. La microscopie de la tuberculose
et méthodes bactériologiques de recherche sont basées sur le travail a des cellules procaryotes que l'analyse biologique est nécessaire pour examiner l'impact de ces cellules dans l'organisme vivant des animaux de laboratoire. Selon le degré de manifestation de ces ou d'autres signes de scientifique de la maladie peut déduire la présence ou l'absence de bactéries pathogènes dans l'échantillon, ainsi que leur propagation naturellement dans le corps de l'animal pour leur culture et leur utilisation ailleurs.
La méthode de recherche bactériologique diffère de la méthode bactérioscopique. Dans la première, une culture spécialement préparée de procaryotes vivants est utilisée pour l'analyse, lorsque la seconde travaille avec des cellules mortes ou vivantes sur une lame.
Les étapes de la méthode bactériologique d'investigation. Microbiologie
principe d'étudier les propriétés de la culture bactérienne peut être utile pour les microbiologistes, les scientifiques qui ont entrepris d'explorer les cellules procaryotes, ainsi que pour le laboratoire, dont la tâche est d'établir les bactéries pathogènes ou non pathogènes, et le diagnostic du patient.
La procédure d'étude des bactéries est divisée en trois étapes:
1. Isolement des bactéries de l'échantillon original.
2. Semis de bactéries et culture de culture pure, étude de ses propriétés.
3. Enquête détaillée sur les cellules bactériennes.
Premier stade de
Un échantillon, ou frottis, est prélevé sur une surface libre du milieu ou du patient. Ainsi, nous obtenons un "cocktail" à partir d'une variété d'espèces de bactéries qui doivent être semées sur un milieu nutritif. Parfois, il devient possible d'identifier immédiatement les bactéries nécessaires, connaissant leurs foyers de distribution dans le corps.
Après deux ou trois jours, les colonies requises sont sélectionnées et étalées sur un milieu solide de boîtes de Pétri avec une boucle stérile. De nombreux laboratoires travaillent avec des tubes à essai, où un milieu nutritif solide ou liquide peut être présent. Ainsi est la méthode bactériologique de la recherche en microbiologie.
La deuxième étape de
Après obtention de colonies individuelles de bactéries, une macro- et microanalyse directe est réalisée. Tous les paramètres des colonies sont mesurés, la couleur et la forme de chacune d'elles sont déterminées. Il est souvent fait en comptant les colonies sur une boîte de Pétri, puis dans le matériau de départ. Ceci est important dans l'analyse des bactéries pathogènes, sur le nombre dont dépend le degré de la maladie.
méthode de recherche bactériologique 2 étape qui consiste à étudier des colonies individuelles de microorganismes peut être couplé à un procédé biologique de l'analyse de bactéries. Un autre objectif du travail à ce stade est d'augmenter la quantité de matériel source. Il peut être fait sur un milieu nutritif, et il est possible de mener une expérience in vivo dans des organismes expérimentaux vivants. Les bactéries pathogènes vont se multiplier et, par conséquent, le sang contiendra des millions de cellules procaryotes. Du sang prélevé, il est facile de préparer le matériel de travail nécessaire des bactéries.troisième étape
La partie la plus importante de l'étude - la définition des propriétés morphologiques, biochimiques, génotoxiques et antigéniques de la culture de bactéries. Le travail est effectué avec des cultures préalablement "purifiées" sur un milieu nutritif, ainsi qu'avec des préparations( souvent colorées) au microscope.
Définir l'appartenance de bactéries pathogènes ou opportunistes à un groupe taxonomique particulier, ainsi que pour déterminer leur résistance aux médicaments permet la méthode de recherche bactériologique. Stade 3 - antibiotiques, c'est-à-dire analyse du comportement des cellules bactériennes dans des conditions de médicaments dans l'environnement.
Une étude de la résistance d'une culture à un antibiotique est d'une grande importance pratique lorsqu'il est nécessaire de prescrire à un patient particulier les médicaments nécessaires et, surtout, efficaces. Ici et la méthode bactériologique de la recherche peut aider.
Qu'est-ce qu'un milieu de culture?
Pour le développement et la reproduction, les bactéries doivent être dans des milieux nutritifs pré-préparés. Par consistance, ils peuvent être liquides ou solides, et d'origine végétale ou animale.
Exigences de base pour les milieux nutritifs:
1. Stérilité.
2. Transparence maximale.
3. Paramètres optimaux de l'acidité, de la pression osmotique, de l'activité de l'eau et d'autres quantités biologiques.
Obtention de colonies isolées de
1. Méthode de Drigalsky. Il consiste à appliquer un frottis avec différents types de micro-organismes sur la boucle bactérienne. Cette boucle est réalisée sur la première boîte de Pétri avec un milieu nutritif. En outre, sans changer la boucle, la méthode de la matière résiduelle est réalisée sur les deuxième et troisième plaques de Petri. Ainsi, sur les derniers échantillons de la colonie, les bactéries ne seront pas ensemencées trop serrées, facilitant ainsi la recherche des bactéries nécessaires au travail.
2. La méthode de Koch. Il utilise des tubes avec un milieu nutritif fondu. On place une boucle ou une pipette avec un frottis de bactéries, après quoi le contenu du tube est versé sur une plaque spéciale. L'agar( ou la gélatine) gèle après un certain temps, et dans son épaisseur, il est facile de trouver les colonies de cellules nécessaires. Il est important avant de commencer à diluer le mélange de bactéries dans des tubes à essai, afin que la concentration de micro-organismes ne soit pas très importante.
La méthode bactériologique d'investigation, dont les étapes sont basées sur l'isolement de la culture bactérienne désirée, ne se passe pas de ces deux méthodes de recherche de colonies isolées.
Antibioticogramme
Visuellement la réaction des bactéries aux médicaments peut être vue de deux manières pratiques:
1. Méthode des disques de papier.
2. Reproduction de bactéries et d'antibiotiques dans un milieu liquide.
La méthode du disque de papier nécessite une culture de micro-organismes qui ont été cultivés sur un milieu nutritif solide. Sur ce support, plusieurs papiers de forme ronde sont placés, imprégnés d'antibiotiques. Si le médicament fait face avec succès à la neutralisation des cellules bactériennes, après un tel traitement reste un site dépourvu de colonies. Si la réaction à l'antibiotique est négative, les bactéries survivront.
Dans le cas de l'utilisation d'un milieu nutritif liquide, plusieurs tubes à essai avec une culture de bactéries de différents degrés de dilution sont d'abord préparés. Les antibiotiques sont ajoutés à ces tubes, et pendant la journée ils observent le processus d'interaction de la substance et des micro-organismes. En fin de compte, un antibiotique qualitatif est obtenu, à partir duquel on peut juger de l'efficacité du médicament pour une culture donnée.
Les principales tâches de l'analyse
Voici les objectifs et les étapes de la méthode d'investigation bactériologique.
1. Obtenir le matériel source qui sera utilisé pour isoler les colonies bactériennes. Il peut s'agir d'un frottis provenant de la surface de tout objet, de la membrane muqueuse ou de la cavité du corps humain, un test sanguin.
2. Culture de culture sur un milieu nutritif solide. Après 24-48 heures sur une boîte de Pétri, vous pouvez trouver des colonies de bactéries de différentes espèces. Nous sélectionnons les critères morphologiques et / ou biochimiques requis et poursuivons le travail avec.
3. Reproduction de la culture obtenue. La méthode de recherche bactériologique peut être basée sur une méthode mécanique ou biologique d'augmentation du nombre de cultures bactériennes. Dans le premier cas, le travail est effectué avec des milieux nutritifs solides ou liquides sur lesquels les bactéries se multiplient dans un thermostat et forment de nouvelles colonies. La méthode biologique nécessite des conditions naturelles pour augmenter le nombre de bactéries, de sorte qu'un animal d'essai est infecté par des micro-organismes ici. Quelques jours plus tard, beaucoup de procaryotes peuvent être trouvés dans un échantillon de sang ou un frottis.
4. Travailler avec une culture purifiée. Pour déterminer la position systématique des bactéries, ainsi que leur appartenance à des agents pathogènes, il est nécessaire de procéder à une analyse approfondie des cellules en fonction des caractéristiques morphologiques et biochimiques. Lorsque l'on étudie des groupes pathogènes de micro-organismes, il est important de connaître l'efficacité de l'action des antibiotiques.
C'était une caractéristique générale de la méthode bactériologique d'investigation.
Caractéristiques de l'analyse
La règle principale de l'examen bactériologique - est la stérilité maximale. Si vous travaillez avec des tubes à essai, les cultures et sous-cultures de bactéries doit être effectuée que sur une lampe à alcool chauffé.
Toutes les étapes de la méthode de recherche bactériologique nécessite l'utilisation d'une boucle spéciale ou d'une pipette Pasteur. Ces deux outils doivent être prétraités dans une flamme de la lampe d'esprit. Quant à la pipette Pasteur, puis immédiatement avant la stérilisation par la chaleur est nécessaire pour rompre la pointe de la pince à épiler de pipette.bactéries technique d'ensemencement
a également ses propres caractéristiques. Tout d'abord, lorsque plaqué sur un milieu solide porté sur la surface de gélose boucle bactérienne. Boucle, bien sûr, doit déjà être sur la surface de l'échantillon de micro-organismes. Aussi pratiqué la culture dans le milieu de culture, auquel cas la boucle ou la pipette devrait atteindre le fond de la boîte de Petri.
Lorsque l'on travaille avec des milieux liquides utilisés tubes. Il est important de vous assurer que le liquide ne touche pas les bords de la verrerie de laboratoire ou de liège et des outils utilisés( compte-gouttes, charnière), ne touchez pas les objets étrangers et les surfaces. Signification échantillon d'analyse méthode de recherche biologique
de
des bactéries a son application pratique. Tout d'abord technique d'études bactériologiques peuvent être utilisées en médecine. Par exemple, il est nécessaire d'étudier la microflore du patient afin d'établir le bon diagnostic, ainsi que pour développer le bon cours de traitement. Il aide à antibiogramme qui montrent une activité de médicaments contre l'agent pathogène de la maladie.bactéries Analyse de
utilisés dans le laboratoire pour déterminer les maladies dangereuses telles que la tuberculose, la fièvre récurrente ou la gonorrhée. Il est également utilisé pour étudier la composition bactérienne des amygdales, des cavités d'organes.
bactériologique peut utiliser la méthode d'investigation pour déterminer la pollution. Selon la composition quantitative et qualitative du frottis à partir de la surface d'un objet est déterminée par le degré d'occupation du milieu par des micro-organismes.