Bakteriologisk metode for forskning: stadier, mål, egenskaper

Studien av bakterier har stor praktisk betydning for mennesker. Til dags dato har et stort antall prokaryoter blitt oppdaget, som avviker fra hverandre i patogenicitet, fordeling, form, størrelse, antall flagell og andre parametere. For å studere denne stammen i detalj, brukes en bakteriologisk undersøkelsesmetode.

Hva er metodene for å analysere bakterieceller?

For å avgjøre om bakterier er patogene, utføres kultur på en rekke måter. Blant dem:

1. Bakterioskopisk metode.

2. Bakteriologisk metode.

3. Biologisk metode.

tuberkulose mikroskopi og bakteriologiske metoder for forskning er basert på den jobben prokaryote celler som biologisk analyse er nødvendig for å undersøke virkningen av slike celler i den levende organisme hos forsøksdyr. I henhold til graden av manifestasjon av disse eller andre tegn på sykdom vitenskapsmann kan antyde tilstedeværelse eller fravær av patogene bakterier i prøven, så vel som deres naturlig forplanter seg i kroppen til dyret for sin kultur og bruk andre steder.

Den bakteriologiske forskningsmetoden skiller seg fra den bakterioskopiske metoden. I den første er en spesielt forberedt kultur av levende prokaryoter brukt til analyse, når den andre arbeider med døde eller levende celler på et lysbilde.

Faser av den bakteriologiske undersøkelsesmetoden. Microbiology

prinsippet for å studere egenskapene til bakteriekulturen kan være nyttig for mikrobiologer, forskere som er fastsatt for å utforske de prokaryote celler, så vel som for laboratoriet, hvis oppgave er å etablere de sykdomsfremkallende eller ikke-patogene bakterier, og deretter pasientens diagnose.

Prosedyren for å studere bakterier er delt inn i tre faser:

1. Isolering av bakterier fra den opprinnelige prøven.

2. Såing av bakterier og dyrking av ren kultur, studier av dens egenskaper.

3. Detaljert undersøkelse av bakterielle celler.

Første fase av

En prøve, eller smøre, tas fra en fri overflate av mediet eller pasienten. Dermed får vi en "cocktail" fra en rekke bakteriearter som må sås på næringsmedium. Noen ganger blir det mulig å identifisere de nødvendige bakteriene umiddelbart, da de kjenner deres distribusjonsfokus i kroppen.

Etter to til tre dager velges de nødvendige koloniene og såres på det faste mediumet av petriskål ved hjelp av en steril sløyfe. Mange laboratorier arbeider med reagensrør, hvor et fast eller flytende næringsmedium kan være til stede. Så er den bakteriologiske metoden for forskning i mikrobiologi.

Den andre fasen av

Etter å ha oppnådd individuelle kolonier av bakterier, utføres en direkte makro- og mikroanalyse. Alle parametrene i koloniene måles, fargene og formen til hver av dem bestemmes. Det gjøres ofte ved å telle kolonier på en petriskål, og deretter i utgangsmaterialet. Dette er viktig i analysen av patogene bakterier, på hvor mange sykdomsgraden avhenger.

bakteriologiske undersøkelser metode 2, trinn som består i å studere de enkelte kolonier av mikroorganismer som kan koples til en biologisk metode for analyse av bakterier. Et annet mål for arbeidet på dette stadiet er å øke mengden av kildemateriale. Det kan gjøres på næringsmedium, og det er mulig å gjennomføre et eksperiment in vivo i levende eksperimentelle organismer. Patogene bakterier vil multiplisere, og som et resultat vil blodet inneholde millioner av prokaryote celler. Fra blodet er det lett å forberede det nødvendige arbeidsmaterialet til bakterier.

tredje trinn

Den viktigste delen av undersøkelsen - definisjonen av morfologiske, biokjemiske, toxigenic og antigene egenskaper av bakteriekulturen. Arbeid gjøres med tidligere "rensede" avlinger på næringsmedium, så vel som med preparater( ofte farget) under et mikroskop.

sett medlemskap av patogene eller opportunistiske bakterier til en spesiell taksonomisk gruppe, så vel som for å bestemme deres resistens tillater bakteriologisk forskning metode. Fase 3 - antibiotika, dvs. analyse av oppførsel av bakterielle celler i forhold til legemidler i miljøet.

En undersøkelse av resistens av en kultur til et antibiotika har stor praktisk betydning når det er nødvendig å foreskrive for en bestemt pasient de nødvendige og viktigst effektive legemidler. Her og den bakteriologiske metoden for forskning kan hjelpe.

Hva er et kulturmedium?

For utvikling og reproduksjon av bakterier bør være i forberedte næringsmedier. Ved konsistens kan de være flytende eller faste, og av opprinnelse - vegetabilsk eller dyr.

Grunnleggende krav til næringsmedier:

1. Sterilitet.

2. Maksimal gjennomsiktighet.

3. Optimale parametere for surhet, osmotisk trykk, vannaktivitet og andre biologiske mengder.

Innhenting av isolerte kolonier av

1. Drigalskys metode. Det består i å påføre et smøre med ulike typer mikroorganismer til bakterieløkken. Denne sløyfen utføres på den første petriskålen med næringsmedium. Videre, uten å endre sløyfen, utføres fremgangsmåten for gjenværende materiale på den andre og tredje platen av Petri. Så, på de siste prøvene i kolonien, vil bakteriene ikke bli podet for tett, og dermed forenkles muligheten for å finne bakteriene som er nødvendige for arbeid.

2. Koch-metoden. Det bruker rør med smeltet næringsmedium. Det legges en sløyfe eller pipette med et smøring av bakterier, hvorpå innholdet av røret helles på en spesialplate. Agar( eller gelatin) fryser etter en stund, og i tykkelsen er det lett å finne de nødvendige koloniene av celler. Det er viktig før du begynner å fortynne blandingen av bakterier i reagensrør, slik at konsentrasjonen av mikroorganismer ikke er så stor.

Den bakteriologiske undersøkelsesmetoden, hvis stadier er basert på isoleringen av den ønskede bakteriekulturen, gjør ikke uten disse to metodene for å finne isolerte kolonier.

Antibiotikum

Visuelt kan reaksjonen av bakterier mot legemidler ses på to praktiske måter:

1. Metode for papirskiver.

2. Avl av bakterier og antibiotika i et flytende medium.

Papirskivemetoden krever en kultur av mikroorganismer som er blitt dyrket på et fast næringsmedium. På dette mediet plasseres flere runde papirer, impregnert med antibiotika. Hvis stoffet vellykket håndterer nøytraliseringen av bakterielle celler, forblir slike behandlinger et sted uten kolonier. Hvis reaksjonen til antibiotika er negativ, vil bakteriene overleve.

Ved bruk av et flytende næringsmedium blir det først forberedt flere rør med en bakterie av bakterier med forskjellige grad av fortynning. Antibiotika legges til disse rørene, og i løpet av dagen observerer de prosessen med samhandling av stoffet og mikroorganismer. Til syvende og sist oppnås et kvalitativt antibiotikum, hvorav man kan bedømme effektiviteten av stoffet for en gitt kultur.

Hovedoppgavene til

-analysen Her er målene og stadiene av den bakteriologiske undersøkelsesmetoden.

1. Hent kildematerialet som skal brukes til å isolere bakteriekolonier. Det kan være et smet fra overflaten av et objekt, slimhinne eller hulrom i menneskekroppen, en blodprøve.

2. Kultivering av kultur på et fast næringsmedium. Etter 24-48 timer på en petriskål kan du finne kolonier av bakterier av forskjellige arter. Vi velger de nødvendige morfologiske og / eller biokjemiske kriterier og utfører videre arbeid med det.

3. Reproduksjon av den oppnådde kulturen. Den bakteriologiske metoden for forskning kan baseres på en mekanisk eller biologisk metode for å øke antall bakteriekulturer. I det første tilfellet utføres arbeid med fast eller flytende næringsmedium som bakteriene multipliserer i en termostat og danner nye kolonier. Den biologiske metoden krever naturlige forhold for å øke antall bakterier, så et testdyr er infisert med mikroorganismer her. Noen dager senere, kan mange prokaryoter bli funnet i en blodprøve eller smøring.

4. Arbeid med en renset kultur. For å bestemme systematisk posisjon av bakterier, samt tilhørende patogener, er det nødvendig å gjennomføre en grundig analyse av cellene i henhold til morfologiske og biokjemiske egenskaper. Når man undersøker patogene grupper av mikroorganismer, er det viktig å vite hvor effektivt virkningen av antibiotika er.

Dette var en generell egenskap ved den bakteriologiske undersøkelsesmetoden.

Analysens egenskaper

Hovedregel for å gjennomføre bakteriologisk forskning er maksimal sterilitet. Hvis arbeid pågår med testrør, bør kulturer og transplantasjoner av bakterier utføres bare over oppvarmet ånd.

Alle stadier av den bakteriologiske undersøkelsesmetoden krever bruk av en spesiell løkke eller en Pasteur pipette. Begge instrumentene må forbehandles i åndlampens flamme. Når det gjelder Pasteur pipetten, så før termisk sterilisering er det nødvendig å bryte pipettens spiss med pincett.

Teknikken for å så bakterier har også sine egne egenskaper. For det første, når du så på solid media, utfør en bakteriell sløyfe over overflaten av agar. Loopen, selvfølgelig, bør allerede ha et utvalg av mikroorganismer på overflaten. Det er også praktisert å så inne i kulturmediet, i hvilket tilfelle sløyfen eller pipetten må nå bunnen av petriskålen.

Ved bruk med flytende medium, brukes rør. Det er viktig å sikre at væsker ikke berører kantene på laboratorieglasset eller korken, og de brukte instrumentene( pipette, sløyfe) ikke berører fremmedlegemer og overflater.

Betydningen av den biologiske metoden for forskning

Analysen av en prøve av bakterier har sin praktiske anvendelse. Først og fremst kan den bakteriologiske metoden for forskning brukes i medisin. For eksempel er det nødvendig å studere pasientens mikroflora for å etablere riktig diagnose, og også å utarbeide riktig behandlingsforløp. Her hjelper antibiotika, som vil vise aktiviteten til rusmidler mot sykdomsfremkallende middel.

Bakteriell analyse brukes i laboratoriet for å identifisere slike farlige sykdommer som tuberkulose, tilbakevendende tyfus eller gonoré.Det brukes også til å studere bakteriell sammensetning av mandler, hulrom av organer.

Den bakteriologiske undersøkelsesmetoden kan brukes til å bestemme forurensning av miljøet. Ifølge den kvantitative og kvalitative sammensetningen av smøret fra overflaten av en gjenstand bestemmes graden av populasjon av dette medium av mikroorganismer.